微透析采集分析系统
微透析(Microdialysis)是一种从生物活体内进行动态微量生化取样的新技术, 可用于麻醉或清醒的生物上, 具有活体连续取样、动态观察、定量分析、采样量小、组织损伤轻等特点。
主要原理:
将一种具有透析作用的微细探针置于采样的生物组织内, 利用一部非常精细的注射泵, 推送溶液至探针处, 以达到与组织内欲取出测量的低分子量物质, 进行透析交换。交换后的透析液被采集,通过高效液相或其它仪器做进一步的分析。
主要特点:
1.时间分辨性,可连续跟踪体内多种化合物量随时间的变化;
2.空间分辨性,取样即时即测,可真实代表取样位点目标化合物的浓度,同时在体内不同部位插入探针可研究目标化合物的体内分布;
3.提供不含蛋白质等大分子物质的游离态小分子化合物,样品因不含蛋白质、酶等大分子物质,可不经预处理直接用于测定。对药物研究有重要意义;
4.不 需处死动物和制备组织匀浆,不破坏机体完整性,可维持实际生理条件,消除传统药物代谢研究中因组织均匀化破坏细胞隔室造成对代谢研究结果的影响,减少实验 动物数量,并可获得有关药物代谢中间过程的信息。(传统方法对血清、尿或粪便中代谢物浓度测定只能了解代谢的最终产物,而不能反映中间过程)
5.研究药动学可从同一动物收集大量样本而不损失体液量,避免了传统研究方法中因采血后血容量减少所造成对药物分布及消除的影响,其时间分辨性可使药动学资料更准确;
6.样品体积恒定,样品中各成分浓度基本不变,膜对药物的非特异性吸附较少;
7.不会因在室温取样而酶解,提高样品稳定性,可从容地进行分离和测定;
8.损伤小,使取样可在清醒、自由活动的动物体内多个器官以及同一器官多个位点连续取样,且动物本身自成空白对照,能准确及时掌握到药物代谢的中间动态信息;
微透析应用领域微透析技术在神经科学、医药研究等领域已获得越来越广泛的应用。
透析方式一般分为以下两种方式:
产品构成:
一、微透析针
微透析探针尾部的独特设计保证了探针受外力拉动后仅会尾部连接处脱开,故而仅需将尾部连接头插好即可而无须重插探针。
二、微量注射泵
微透析专用微量注射泵由双马达驱动,每个马达驱动两个注射器。灌注液流速0.0001 - 99.99μl/分钟,注射器容积10μl-5ml。
三、透析液采集器
透析液收集器是将从探针中采集的样本收集起来。所用容器为PCR96孔板或500ul离心管(将离心管放在收集器的孔板上用来盛放收集的样品)。为了保证样本不会变质,在收集器中特设置了一个低温调节装置。低温调节装置和收集器是分体的,通过电缆线进行连接,由收集器的控制面板进行温度控制。温度控制范围0-4℃。这样就保证了样品的新鲜而且不会变质。采集速率5秒至99分钟,1秒步进。可同时采集1,2,4通道的透析液。
四、透析液输送器
透析液输送器可以使微透析系统透析液收集器采集的样品自动注入高效液相仪。仪器设置好以后无须人工动作就可以得到数据。采集到样品后自动注入器就发送一个信号给高效液相仪并注入样品,使得样品暴露氧化机会最小;
五、样品分析器
超高灵敏性,使用电化学探测最大的优点是灵敏。EICOM一直致力于提高仪器的敏感度。HTEC-500与适当的应用结合,可轻易的确保多巴胺及复合胺160 amol的灵敏度,乙酰胆碱5 fmol的灵敏度。
该设备可以进行如下测量:乙酰胆碱Acetylcholine(微透析样品)
辅酶Coenzyme Q10和维他命Vitamin K1(苯醌)(预电解细胞)
多巴胺(DA)复合胺(5-HT)(微透析样品)
多巴胺Dopamine,复合胺Serotonin,降肾上腺素Norepinephrine(微透析样品
)谷氨酸盐(Glu)(各种样本)
伽马氨基丁酸(GABA)(微透析样品)
硫醇Thiols(血浆样品,组织样品,培养基等)
3-硝基酪氨酸3-Nitrotyrosine(水解蛋白)
一元胺Monoamine,代谢物(组织匀浆)
儿茶酚胺Catecholamines(血浆)
注:EICOM微透析系统仅用于动物实验,不用于人的相关检测。
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